广东技师院校哪个好考点 检验技师/士考点:尿蛋白定性试验方法

【导读】作为初级检验技师，其需要掌握的基础技能及知识要点就是采血方法及其各项方法之间的区别，出现频率较大的就是静脉采血法与皮肤采血法的区别是什么?为了帮助各位考生更好的了解此项知识点，助力检验职称考生复习，小编今天为大家整理级检验技师基础考点之采血方法，内容如下：

静脉采血：多采用位于体表的浅静脉，通常采用肘部静脉、手背静脉、内踝静脉或股静脉。

皮肤采血法：曾称为毛细血管采血法，是采集微动脉、微静脉和毛细血管的混合血，同时含细胞间质和细胞内液。

皮肤采血缺点是易于溶血、凝血、混入组织液，而且局部皮肤揉擦、针刺深度不一、个体皮肤厚度差异等都影响检查结果，所以，皮肤采血检查结果重复性差、准确性不好。

静脉采血的操作环节多、难于规范统一，在移液和丢弃注射器时可能造成血液污染。静脉采血有利于样本收集运送和保存，防止院内血源性传染病。

以上就是小编今天给大家整理分享的关于“初级检验技师基础考点之采血方法”的相关内容，希望对各位考生有所帮助。至于检验初级师多久考中级这个问题，小编认为，一关一关过，先把初级检验技师过了再说。

2017年检验技师考试《免疫检验》重要考点汇总

免疫检验是临床检验技师考试的科目之一。你知道临床检验技师考试免疫学检验都考哪些知识吗?下面是我为大家代码的免疫检验科目考试重点汇总，欢迎阅读。

免疫检验科目考试重点汇总

0、免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应。

1、免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能

2、免疫防御(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。

3、中枢免疫器官：骨髓、胸腺;外周免疫器官：淋巴结、脾脏(最大)、黏膜相关淋巴组织

4、B细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导体液免疫;B细胞受体=BCR=mIg

表面标志：膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体。

成熟B细胞：CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B细胞的mIg主要为mIgM和mIgD)同时检测CD5分子，可分为B1细胞和B2细胞。

B细胞功能检测方法：溶血空斑形成试验(体液免疫功能)。

5、T细胞：介导细胞免疫。共同表面标志是CD3(多链糖蛋白);辅助T细胞的标志是CD4;杀伤T细胞的标志是CD8;T细胞受体=TCR。

T细胞和NK细胞的共同表面标志是CD2(绵羊红细胞受体);

CD3+CD4+CD8- = 辅助性T细胞(Th)

CD3+CD4-CD8+ = 细胞毒性T细胞(Tc或CTL)(T细胞介导的细胞毒试验)

CD4+CD25+ = 调节性T细胞(Tr或Treg)

T细胞功能检测：植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T细胞增殖。增殖试验有：形态法、核素法。

T细胞亚群的分离：亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法

*E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验;

6、NK细胞：具有细胞介导的细胞毒作用。直接杀伤靶细胞(肿瘤细胞和病毒感染的细胞)

表面标志：CD16(ADCC)、CD56。

测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株，而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。

7、吞噬细胞包括：单核-吞噬细胞系统(MPS，表面标志CD14，包括骨髓内的前单核细胞、外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞)和中性粒细胞。(表达MHCⅡ类分子)

8、人成熟树突状细胞(DC)(专职抗原呈递功能)：表面标志为CD1a、CD11c和CD83。

9、免疫球蛋白可分为分泌型(sIg，主要存在于体液中，具有抗体功能)及膜型(mIg，作为抗原受体表达于B细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白)

10、免疫球蛋白按含量多少排序：IgG>IgA>IgM>IgD>IgE五类(按重链恒定区抗原性(CH)排序)

免疫球蛋白含量测定：单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。

11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于恒定区(CH、CL)

12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和VL(高变区)是抗原结合部位。

13、IgG：血清中含量最高的免疫球蛋白(IgG1最高)，血液和细胞外液中的主要抗体。也是再次免疫应答的主要抗体，是唯一能通过胎盘的抗体，大多数抗菌抗体、抗病毒抗体是IgG，某些自身抗体及超敏Ⅱ型抗体是IgG，免疫学检测中第二抗体也以IgG为主。

14、IgA：分血清型(单体存在)及分泌型;分泌型IgA(sIgA)为二聚体，性能稳定，主要存在于胃肠道、支气管分泌液、初乳、唾液、泪液中，局部浓度高，是参与黏膜局部免疫的主要抗体。

15、IgM：为五聚体，主要存在于血液中，是Ig中分子量最大的(又称巨球蛋白)。个体发育最早合成和分泌的抗体。抗原刺激后体液免疫应答中最先产生的抗体，感染过程中血清IgM水平升高，说明近期感染。新生儿脐血中若IgM增高，提示有宫内感染。

16、IgE：为单体结构，正常人血清中含量最低。IgE为亲细胞抗体，介导Ⅰ型超敏反应。特异性过敏反应和寄生虫早期感染患者血清中可升高。

17、补体：具有酶样活性的球蛋白(肝细胞、巨噬细胞产生);激活途径主要有三种：经典途径(以结合抗原后的IgG或IgM类抗体为主要激活剂(双链DNA)，C1～C9全部参与)、替代途径(病原微生物细胞壁成分(脂多糖)直接激活补体C3，然后完成C5～C9的激活过程)、MBL途径(由急性炎症期产生的甘露糖结合凝集素(MBL)与病原体结合后启动激活)。

18、补体系统中C3含量最多，C2含量最少。

19、灭活：加热56℃30分钟，补体丧失活性

20、补体清除免疫复合物的方式：吞噬调理;免疫粘附;免疫复合物抑制。

21、完全抗原=反应原性+免疫原性。半抗原=反应原性(无免疫原性)

22、抗原抗体结合力(分子间引力)：静电吸引、范德华力、氢键、疏水作用力(最强)

23、抗原抗体反应的四大特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性;受反应条件(如温度、pH、电解质、抗原抗体比例等)的影响。

24、抗体过量——前带;抗原过量——后带(钩状效应)

25、抗原抗体反应可分为两个阶段：第一阶段为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应;第二阶段为可见反应阶段，此阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。

26、颗粒性抗原出现凝集反应。可溶性抗原出现沉淀反应。单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。

27、木瓜酶水解IgG为2Fab+Fc;胃蛋白酶水解IgG为F(ab)2+nFc。

28、最常用于免疫动物的佐剂是弗氏佐剂，弗氏佐剂分为弗氏完全佐剂(弗氏不完全佐剂加卡介苗)和弗氏不完全佐剂两种。

29、R(兔子)型抗血清是用家兔及其他动物免疫产生的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较宽，适于作诊断试剂。

H(马)型抗血清是用马等大动物免疫获得的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较窄，一般用作免疫治疗。

30、抗血清常见保存条件：2-8℃保存;冷冻保存(最常用);真空干燥保存(5-10年)。

31、杂交瘤细胞放入液氮(-196℃)前，需要逐步降温。复苏细胞时，从液氮罐内取出冻存管，立即浸入37℃水浴。

32、凝集反应分为两个阶段：①抗原抗体的特异性结合;②出现可见的颗粒凝聚。

33、直接凝集反应的原理是细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当的电解质(0.85%氯化钠)参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。抗原=凝集原，抗体=凝集素。

34、玻片凝集试验：主要用于抗原的定性分析，AB0血型的测定。

试管凝集试验：肥达氏试验、外斐试验、输血交叉配血试验;

35、红细胞包被抗原，用以检测抗体的血凝反应，称为正向间接血凝反应(PHA)。

红细胞包被抗体，用以检测抗原的血凝反应，称为反向间接血凝反应(RPHA)。

36、间接血凝抑制试验：可用于检测抗体、自身抗体、变态反应性抗体，也可测定抗原。

37、金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)

38、血凝试验可在微量滴定板或试管中进行，将标本倍比稀释，一般为1:64，同时设不含标本的稀释液为对照孔。凡红细胞沉积于孔底，集中呈一圆点的为不凝集。如红细胞凝集，则分布于孔底周围。

39、明胶凝集试验(间接)：HIV-1抗体和抗精子抗体检测

40、抗球蛋白试验，又称Coombs试验，是检测抗红细胞不完全抗体的一种很有用的方法。包括直接Coombs试验(检测红细胞上的不完全抗体)和间接Coombs试验(游离在血清中的不完全抗体)

41、沉淀反应分两个阶段：第一阶段为抗原抗体发生特异性结合，几秒到几十秒即可完成，出现可溶性小的复合物，肉眼不可见。第二阶段为形成可见的免疫复合物，约需几十分钟到数小时才能完成，如沉淀线、沉淀环。

42、免疫比浊：最适pH为6.5～8.5，磷酸盐缓冲液。

43、对流免疫电泳：抗体流向负极，抗原流向正极

44、免疫固定电泳也用予尿液中本-周蛋白的检测及κ、λ分型，脑脊液中寡克隆蛋白的检测及分型。

45、RIA(放免)核素(125Ⅰ)标记抗原，竞争抑制(标记抗原和非标记抗原竞争限量抗体);IRMA(免疫放射)核素标记抗体，非竞争结合(过量标记抗体，反应速率比RIA快，灵敏度明显高于RIA。)

RIA可以测定大分子和小分子抗原，但IRMA则只能测定至少有两个抗原决定簇的抗原。

46、常用的荧光素有：异硫氰酸(FITC)黄绿色，最常用;四乙基罗丹明(RB200)橘红色;四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)橙红色;藻红蛋白(R-RE)橙色。其他：铕(Eu3+)

47、荧光标记蛋白的常用方法：搅拌法和透析法。

荧光抗体效价鉴定：抗原含量为1g/L时，抗体效价>1：16

48、时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)以镧系元素(如：铕)化合物为荧光标记物。

49、偏振免疫测定的偏振波长是485nm(蓝光)。

50、辣根过氧化物酶(HRP)：底物(1)邻苯二胺(OPD)，(2)四甲基联苯胺(TMB) ELISA中应用最广泛的底物。

碱性磷酸酶(ALP)：底物：对-硝基苯磷酸脂(p-NPP)

β-半乳糖苷酶(β-Gal)：底物：4-甲基伞酮基-R-D半乳糖苷(4-MUU)

51、异相法：先分离，后测定;均相法：不分离，直接测。

52、酶联免疫吸附试验(ELISA)：

必要的试剂：①固相的抗原或抗体;②酶标记的抗原或抗体;③酶反应的底物。

抗原测定：蛋白大分子抗原用得最多的是双抗体夹心法(HBsAg)。只有单个抗原决定簇的小分子，则使用竞争抑制法。

抗体测定：通常使用间接法(HCV、HIV)、双抗原夹心法(HBsAb)、竞争法(HBcAb、HBeAb)和捕获法(IgM)等

*待测孔最后显示的颜色深浅与标本中的待测抗原或抗体呈正相关的是：双抗体夹心法、双位点一步法、间接法测抗体;

53、化学发光底物有：直接化学发光剂：吖啶酯和三联吡啶钌;酶促反应发光剂：(标记酶HRP)鲁米诺及其衍生物、(标记酶为碱性磷酸酶)AMPPD;

54、免疫印迹实验中常选用多克隆抗体。

55、外周血单个核细胞的分离的分层液常用：Ficoll(由上到下为血浆，单个核细胞，粒，红)和Percoll(由上至下：死细胞，单个核细胞，淋，红，粒)。

56、纯淋巴细胞群的采集有：黏附贴壁法，吸附柱过滤法，磁铁吸引法，Percoll分离液法。

57、T细胞和B细胞的分离：E花环沉降法，尼龙毛柱分离法

58、淋巴细胞活力测定：台盼蓝染色法，死细胞为蓝色。

59、CD4是HIV受体，HIV感染时CD4/CD8比值明显降低。

60、CD4/CD8升高常见于自身免疫性疾病;而CD4/CD8降低常见于病毒感染、恶性肿瘤和再生障碍性贫血等。

61、(ELISA)双抗体夹心法是用于细胞因子测定的最常用方法。

62、流式细胞仪：前向散射光(FS)反映颗粒的大小。侧向散射光(SS)反映颗粒内部结构复杂程度、表面的光滑程度。荧光(FL)反映颗粒被染上荧光部分数量的多少。

63、免疫荧光标记最常用的荧光染料：异硫氰酸荧光素(FITC)亮绿色荧光。德州红红色荧光。藻胆蛋白类橙色至红色荧光。

64、临床上常用三色荧光抗体标记将CD3-CD16+CD56+淋巴细胞确定为NK细胞。

65、AIDS患者的一个特征性免疫诊断指标表现为：T淋巴细胞总数减少，T细胞亚群CD4Th/CD8Tc比例倒置，Th/Tc<1.0，Th细胞数量显著下降甚至测不出，而Tc细胞数量可正常或增加，NK细胞减少或活力下降，B淋巴细胞群则处于正常范围。

65、强直性脊柱炎——HLA-B27

66、SLE患者以IgG、IgA升高较多见。类风湿关节炎患者以IgM增高为主。

67、M蛋白(MP)是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖(>30g/L)所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白。多无免疫活性，故又称副蛋白。临床上多见于多发性骨髓瘤、高丙种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等

68、M蛋白-最基本方法：血清蛋白区带电泳技术

M蛋白-粗筛试验：血清免疫球蛋白定量(单向琼脂免疫扩散法和免疫比浊法)

M蛋白-鉴定，首选方法：免疫固定电泳(IFE)技术(区带电泳技术与特异性抗血清的免疫沉淀反应相结合)是临床最常用的方法。

69、IgD降低见于原发性无丙种球蛋白血症、矽肺

70、CSF中的浓度：IgG>IgA>IgM。神经系统肿瘤时，以IgA和IgM升高为主。

(感染、血管病变、系统性疾病=IgG升高)

71、本-周蛋白即尿中游离的免疫球蛋白轻链。尿中可测得，血中呈阴性(原因是本-周蛋白分子量小，极易迅速自肾脏排出，血中含量并不升高)

72、冷球蛋白又称冷免疫球蛋白，在-4℃时发生沉淀，于37℃时又复溶解。采血是冷球蛋白检测的`关键，宜在体温条件下采集和保存静脉血。

73、补体结合试验(CFT)，梅毒的诊断，华氏反应。

74、非均相荧光免疫测定：时间分辨荧光免疫测定法。

均相荧光免疫测定：荧光偏振免疫测定法。

75、链球菌感染：ASO(胶乳凝集试验、免疫散射比浊法)

76、伤寒沙门菌有菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(Vi)抗原。肥达反应，效价≥1:80为阳性

77、卡氏肺孢菌，又称卡氏肺孢子虫，为类真菌。

78、Ⅰ型超敏反应：由特异性IgE抗体介导产生，其发生速度最快。(青霉素、支气管哮喘)

提高Th1细胞活性，减少IL-4的分泌，可降低IgE的产生，阻断IgE介导的Ⅰ型超敏反应。

参与Ⅰ型超敏反应：肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞。

79、Ⅱ型超敏反应：又称细胞毒型或细胞溶解型超敏反应，它是由靶细胞表面的抗原与相应IgG或IgM类抗体结合后，在补体(细胞溶解)、巨噬细胞(吞噬)和NK细胞(ADCC作用)参与下，引起的以细胞溶解或组织损伤为主的病理性免疫反应。(输血反应、新生儿溶血症、自身免疫性溶血性贫血、药物过敏性血细胞减少症、肺出血肾炎综合征、甲状腺功能亢进)

80、Ⅲ型超敏反应：由可溶性免疫复合物沉积于局部或全身多处毛细血管基底膜，通过激活补体，并在血小板、嗜碱性粒细胞、中性粒细胞等的参与下，引起的以充血水肿、局部坏死和中性粒细胞浸润为主要特征的炎症反应和组织损伤。(Arthus反应、类Arthus反应、血清病、链球菌感染后肾小球肾炎、类风湿关节炎、SLE)/81、Ⅳ型超敏反应：又称迟发型超敏反应(DTH)，是效应T细胞与特异性抗原结合后，引起的以单个核细胞浸润和组织损伤为主要特征的炎症反应。(细胞免疫)效应性CD4+Th1细胞识别抗原后活化，可释放IFN-γ、TNF、淋巴毒素(LT)、IL-3、GM-CSF、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)等多种细胞因子。

常见Ⅳ型超敏反应性疾病：感染性迟发型超敏反应(结核分枝杆菌、病毒、原虫)、接触性皮炎、移植排斥反应。(结核菌素皮试、斑贴试验)

82、变性的IgG可刺激机体产生抗变性IgG抗体(类风湿因子)

83、ITP患者血清中存在有抗血小板抗体，该抗体可以缩短血小板的寿命。

84、抗乙酰胆碱受体抗体：对重症肌无力(MG)具有诊断意义。

85、毒性弥漫性甲状腺肿患者血清中有抗促甲状腺激素受体(TSHR)的IgG型自身抗体。(甲状腺功能的亢进)

86、多发性肌炎是以损害肌肉为主要表现的自身免疫性疾病，如果同时有皮肤损害，则称为皮肌炎。

87、75%的PSS患者有抗核抗体阳性，抗Scl-70抗体是PSS的特异性抗体，80%～95%的局限性硬皮病患者抗着丝点抗体阳性。

88、自身免疫病(AID)的特征：高滴度自身抗体，病理特点为免疫炎症损伤与抗原分布一致，能建动物模型。

89、抗DNP抗体(抗核蛋白抗体)通常完全被DNA和组蛋白吸收，是形成狼疮细胞的因子。

90、ANA阳性的荧光现象分：核膜型、均质型、斑点型、核仁型。ANA常为自身免疫病的初筛试验。

91、ENA是可提取核抗原的总称，分子中不含DNA。

92、抗dsDNA抗体对SLE有较高的特异性。抗Sm抗体也是SLE的特异性标志之一。此两项常为SLE确诊指标。(对疑为SLE的患者，应先进行ANA和抗dsDNA抗体的检测，当ANA和(或)抗dsDNA抗体阳性时，再作抗ENA抗体谱的检测。如有抗Sm抗体和(或)抗RNP抗体阳性，可实验室诊断为SLE)

93、抗核RNP抗体：为MCTD(混合性结缔组织病)的诊断指标。

94、抗SSA/抗SSB抗体：为干燥综合征(SS)的诊断指标。(当ANA阳性而抗dsDNA抗体阴性，抗ENA抗体谱中抗SsA抗体和(或)抗ssB抗体阳性，可实验室诊断为干燥综合征。)

95、抗Jo-1抗体：多发性肌炎(PM)患者常为阳性。

96、抗Scl-70抗体：进行性系统性硬皮症(PSS)的诊断指标。

97、NCA：原发性小血管炎的特异性血清标志物

98、内风湿性关节炎(RA)：自身抗体有RF、抗角蛋白抗体(AKA)、抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)。

99、Farr法测定dsDNA抗体的特异性高，为公认标准法，当抗dsDNA抗体结合率大于20%时对SLE有意义。

100、抗线粒体抗体(AMA)：原发性胆汁性肝硬化

101、巨球蛋白血症：以分泌IgM的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病。好发于老年男性，主要表现骨髓外浸润，以肝、脾和淋巴结肿大为主要体征并伴有血黏滞过高综合征，如表现为视网膜出血。(血清呈胶冻状难以分离，电泳时血清有时难以泳动，集中于原点是该病的电泳特征)

102、异常免疫球蛋白检测的应用原则

初筛实验：区带电泳分析、免疫球蛋白定量检测和尿本-周蛋白定性检测。

确证实验：免疫电泳、免疫固定电泳、免疫球蛋白亚型、血清及尿中轻链蛋白的定量检测。

103、HIV诱导的免疫应答

1.体液免疫应答HIV感染后，机体可产生：中和抗体、抗P24壳蛋白抗体、抗gp120和抗gp41抗体

2.细胞免疫应答：CD8+T细胞应答、CD4+T细胞应答。

104、HIV抗原检测：核心抗原p24(ELISA)

105、免疫印迹法判断标准为：①HIV抗体阳性：至少有两条膜带(gp41/gp120/gp160)或至少一条膜带与p24带同时出现;②HIV抗体阴性：无HIV抗体特异性条带出现;③HIV抗体可疑：出现HIV特异性条带，但带型不足以确认阳性者。

CD4+T细胞计数是反映HIV感染患者免疫系统损害状态的最明确指标。当CD4+T细胞低于500/μl，则易机会性感染;低于200/μl，则发生AIDS。

106、CEA大于60μg/L时可见于结肠、胃、肺癌。手术6周后CEA水平正常。

107、AFP——原发性肝癌。PSA——前列腺癌

108、糖类抗原有：CA125：上皮性卵巢癌和子宫内膜癌;CA15-3：乳腺癌;CA19-9：胰腺癌、结直肠癌。

109、神经母细胞瘤和小细胞肺癌(基因有P53，RB)的标志物：神经元特异性烯醇化酶(NSE)

110、排斥反应有：宿主抗移植反应(HVGR)和移植物抗宿主反应(GVHR)。

111、移植物存活与HLA配型的关系是：①供、受者HLA-A和HLA-B相配的位点数越多，移植物存活几率越高;②供、受者HLA-DR位点相配更重要，因为HLA-DR和HLA-DQ基因有很强的连锁不平衡，DR位点相配的个体，通常DQ位点也相配;③不同地区HLA匹配程度与移植结果的关系有着不同的预测价值。

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检验技师/士考点：尿蛋白定性试验方法

尿蛋白定性尿蛋白定性实验是尿常规检查中必做的一项实验，是诊断肾脏疾病和病变的重要常规指标之一。尿蛋白定性试验常通过半定量方式或加号方式检测尿液中排出的蛋白质的.多少，用于判断和了解肾脏功能是否出现问题及问题的严重性，其结果可用阴性、微量、1--4个加号表示，也可用数值表示，加号越多或数值越高则尿蛋白越多。

1.试带法

利用pH指示剂的蛋白误差原理。本法对清蛋白较敏感，对球蛋白不敏感，仅为清蛋白的1/100～1/50，且可漏检本周蛋白。尿液pH增高可产生假阳性。本法快速、简便、易于标准化，适于健康普查或临床筛检。

2.加热乙酸法

为传统的经典方法，特异性强、干扰因素少。能同时检出清蛋白及球蛋白尿，但敏感度较低，一般在0.15g/L左右。本法能使含造影剂尿液变清，可用于鉴别试验。

3.磺基水杨酸法

又称磺柳酸法。操作简便、反应灵敏、结果显示快，与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能发生反应;敏感度高达0.05～0.1g/L，因而有一定的假阳性。被NCCLS作为干化学法检查尿蛋白的参考方法，并推荐为检查尿蛋白的确证试验。

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首先需要做省考和国考的区分。
省考的笔试考点安排是根据您所报的单位，一般在该单位所属地级市进行考试，省考的考点是不可选择的。被安排到哪里就是哪里，一般是所在地级市的大中专院校。
国考考试在全国各省会城市、自治区首府、直辖市和个别较大城市设置考场。报考人员应按照准考证上确定的时间和地点参加考试。参加考试时，必须同时携带准考证和身份证。缺少证件的报考人员不得参加考试。报考7个非通用语职位的考生在网上报名时，务必将考点选择为北京。具体根据你所报考的单位安排。国家公务员考试备考教材。
考试最终具体考试地点以打印准考证上写的为准。

检验技师考点：抗血清的保存

(1)经签定合格后的抗血清，以1：100比例加入1%的硫柳汞或5%的叠氮钠，使其最后浓度分别为0.01%或0.05%.

(2)用无菌滴管将抗血清分装小管，每管装1ml左右。

(3)-20℃以下保存，可保存2年以上。

(4)如有条件可将血清冷冻干燥保存于4℃以下，保存时间更久。

制备：

1、动物的选择

羊、马、鸡、猴、豚鼠，都是常用的免疫动物，在实验中，选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体等因素。免疫用动物应选适龄、健壮.最好为雄性。最常用的实验动物是家兔，一般选择选择年龄在6个月以上当年繁殖的♂性，体重2 ～3公斤，健康家兔三只，免疫前用金属编号牌固定兔耳，或用染料涂沫在动物的背部，作出明确的标记。

2、抗原制备

1)抗原稀释：用灭菌生理盐水将抗原稀释为2mg/ml，于免疫前一天加入溶液，使每毫升抗原溶液含青霉素1000 UI，链霉素1000 UI，放4℃过夜(一般可不加青、链霉素)次日取出，与佐剂混合制成乳剂后用于动物免疫。

免疫原的注射剂量应考虑其抗原性的强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。对于纯的可溶性抗原的免疫剂量，通常小鼠首次抗原剂量为50～100μg/次，大鼠为100～200μg/次，兔为100μg ～1 mg/次，合成免疫原为2 mg(半抗原约为20～200μg)，一般需要与等量的福氏完全佐剂混合。加强免疫的剂量为首次计量的1/2，通常用不完全福氏佐剂或不用佐剂。如需制备高度特异性的抗血清，可选用低剂量抗原短程免疫法;反之，欲获得高效价的抗血清，宜采用大剂量抗原长程免疫法。

2)佐剂和抗原乳剂的配制

1佐剂的配制：福氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant)，各实验室的配方不尽相同，我室采用的配方如下：

医用液体石腊 20毫升

羊毛脂 12克

水浴溶化、混匀，分装于青霉素小瓶，用纱布、线绳扎紧瓶塞。8磅20分钟灭菌，4℃保存备用。于免疫前准备抗原乳剂制备时，以活卡介苗(有时亦用死卡介苗)代替死结核菌，每毫升试剂中加入10mg活卡，即为福氏完全佐剂。

2抗原乳剂的制备：其方法一般有两种，其一，将等量的完全佐剂(注意佐剂必须预先加热融化，但不超过50℃)和抗原溶液分别吸入两个5ml注射器内，在两个注射器的12# 针头间套上一根长约8～12cm的医用无毒塑料管，将两个注射器连接在一起(塑料管必须先经酒精浸泡消毒，使用时取出，用灭菌生理盐水冲洗后，与注射器针头相连接，塑料管与针头的口径须合适，不能松，稍紧些为宜)，针头插进塑料管约1～2cm然后由两人相对而坐后缓缓推动针蕊，使管内溶液进入塑料管道至对侧注射器内，每次推动针蕊时必须把管内容物全部推出，另一侧也同样操作，使管内液体往返混合，直至形成油包水乳剂(Water-in-oil enulsion)为止。

其二是，将等量的佐剂和抗原溶液倒入钵内，经过反复碾磨，也可形成油包水乳剂，该法主要优点是快速，可靠，不足方面主要是由于粘附过多，浪费佐剂及抗原。

制成的乳剂是否形成油包水乳剂直接影响免疫效果，因此，必须进行质量检查，检查的方法是将制成的乳剂滴一滴在凉水(自来水)表面，质量合格的乳剂滴入水面保持滴珠完整而不分散，不合格者进入水面后立即扩散，水面油亦逐渐扩大，这就必须要继续操作至质量合格为止。

但有时，由于佐剂的配制质量原因，很难乳化至合格，遇有这种情况，须考虑重新配制佐剂。

3、免疫途径，剂量和免疫周期

抗原注射途径可根据不同抗原及试验要求，选用皮内、皮下、肌肉、静脉或淋巴结内等不同途径注入抗原进行免疫。一般常采用背部、足掌·耳后等处皮内或皮下多点注射。初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2～4周。常规免疫方案为抗原加CFA皮下多点注射进行基础免疫;再以免疫原加IFA作2～5次加强免疫，每次间隔2～3周，皮下或腹腔注射加强免疫。

1)常规(皮内多点注射)免疫：

1第一次免疫：剂量为每只兔子注射1.0 ml抗原乳剂(含抗原量1～2mg)。注射部位为两只后脚掌的皮内各注射0.2 ml，其余0.6 ml分多点注入脊柱二侧，颈部，腹股沟和腋窝等处淋巴结附近部位皮内，每点可注入0.05ml，分12点注入。

2第二次免疫：初次免疫后20天左右，剂量为1.0ml/只(1～2 mg/ml)，加福氏不完全佐剂。注射部位在腹部皮下多点注射，每点注入0.1 ml。

3第三次免疫：再次免疫后两周内进行，注射剂量和部位同第二次免疫，免疫后7～14d抽取少许静脉血，分离血清，试血测定效价。

2)淋巴结免疫：主要优点是可减少用量。过程如下：

1卡价苗致敏：免疫前足掌皮下每侧各注入活卡价苗(75 mg/ml)0.3 ml。10天左右观察两侧�N窝淋巴结，一般可肿胀如蚕豆大小，此时即可进行淋巴结内免疫注射。

2第一次免疫：用手指定淋巴结后在两侧�N窝淋巴结内各注入抗原乳剂0.25ml，每只兔总量0.5 ml;为加强免疫，于初次免疫20天后，于腹部皮下多点注射不加佐剂抗原溶液1mg/1ml。

3二周后可如同第一次免疫的剂量和途径再注射一次，一般可在第三次免疫注射前试血滴定效价，效价如已达到要求可不必进行第三次免疫。

有条件的.情况下，免疫后要加强动物饲料管理，如给熟黄豆饲养等。

3)腹腔免疫：一般不必加佐剂，适用于细胞性或颗粒性抗原，而且抗原性较强者，例如用绵羊红细胞免疫家兔或小鼠即可用此法。

4、试血，测定抗体效价

一般在第三次免疫后7～10天即可于兔耳静脉或小鼠尾尖取少量血，分离出血清之后进行试血。

① 环状试验，较为经典的方法，目前较少采用，如与20μg/ml以下的抗原于30 min内能出现“艹”的沉淀环，即测定抗体效价达1：5000以上时为合格。

② 免疫双扩散法，这是最常用的试血方法，其具体方法是，中间孔加稀释的抗原(1mg/ml)10μl，周围孔顺时针方向加制备的抗血清分别为1:2, 1:4, 1:8，1:16，1:32和1:64，(用生理盐水或PBS稀释)。经37℃保温24h后观察结果，效价在1:16以上即可决定放血。

5、放血

经效价检查合格后即可放血。放血前动物应停食12 h，以减少血清中的脂肪含量。如拟保留该免疫动物，可直接由心脏取血，或切开耳缘静脉滴血或心脏穿刺取血。取血后由静脉缓缓注入等量5%葡萄溶液以补足失血量。取血的动物经2～3个月休息，可再次加强免疫后取血。如拟一次放血致死，可用颈动脉放血的方法，各种取血方法如下。

1)心脏取血：固定动物于仰卧位置，用食指探明心脏博动量高部位(在胸骨左侧，由下向上数第3与第4助骨之间，指兔)，剪去少许毛，用2.5% 碘酒和75%酒精消毒后，以9#针头在预定位置与胸部呈45。角刺入心脏，微微上下移动针头，待见血液进入针筒后，即将注射器位置固定取血。2.5公斤体重的家兔一次可取血20～30ml。

2)耳缘静脉滴血：先将耳缘静脉附近的毛剪去用无菌棉球将皮肤擦干净(不用酒精消毒，避免溶血)。用台灯照射耳部使血管因温度增高而扩张，然后用无菌刀片将耳缘静脉切一长0.5cm的纵切口，第一次切口应从耳尖部开始，以后再切时，逐步向耳根方向移动。用无菌试管或平皿收集流出的血液。如切口凝血，血流不畅时，可用无菌棉棒轻轻将切口外血凝块擦去(注意勿使切口损伤太大)，血流仍可继续流出，直至达到所需要的血量为止。取血后用无菌棉球压迫切口止血。耳缘静脉取血一次可取血50ml左右而动物不死。

3)颈动脉放血：使动物仰卧固定四肢，颈部剪毛、消毒后纵向切开前颈部皮肤长约10cm，用止血钳将皮肤分开夹住，剥离皮下组织，露出肌层，用刀柄加以分离，即见搏动的颈动脉。小心将颈动脉和迷走神经剥离长约5cm，选择血管中段，用止血钳夹住血管壁周围的筋膜。远心端用丝线结扎，近心端用动脉钳夹住，用酒精棉花球消毒血管周围，用无菌剪刀剪一V形缺口。取长2.5cm、直径为1.6mm塑料管一段，将一端剪成针头样斜面，并将此端插入颈动脉中，另一端放入200ml无菌三角瓶内，然后放开止血钳，血即流入三角瓶内，动物流血至死，2.5公斤家兔可放血80～100ml。

6、分离血清

必须在无菌条件下进行，待收集于平皿或三角瓶内的血液凝固之后，用无菌滴管在无菌环境(例如超净工作台)中把血块与瓶壁剥离后，放入37℃，1～2h取出后放入4℃过夜，使血清充分析出(不能冰冻，否则产生溶血)，经离心沉淀分出血清，放进低温冰箱保存。使用前必须经过签定合格后再分装保存备用。

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